隨著社會越來越發達,大家都選擇在網絡上汲取相關知識內容,比如mirna靶基因分析(怎么大規模鑒定miRNA靶基因?) ,為了更好的解答大家的問題,小編也是翻閱整理了相應內容,下面就一起來看一下吧!
(資料圖片僅供參考)
mirna靶基因分析(如何大規模鑒定miRNA靶基因?)
降解測序
miRNA靶基因鑒定的首選武器
說到degradome測序,想必知道的人都不陌生。是miRNA靶基因鑒定的首選工具!沒聯系過的人又感嘆,這算什么?生活就是這樣,總是充滿各種差異。但是,最重要的是,不管有沒有接觸過,都要有必要的知識儲備。這也是小編文章的初衷。和小編一起散步吧~
降解測序的起源
說到降解基因組測序,我們必須從microRNA開始。MicroRNA(miRNA)是一種內源性非編碼小RNA,長度約22nt,在轉錄后水平上以完全或不完全匹配的方式與mRNA(靶基因)結合,引起mRNA剪切降解或抑制mRNA翻譯來調節基因表達,進而發揮其生物學調節功能。在動物中,基因翻譯大多被抑制,而在植物中,目標基因大多被剪切。
由于mirna的結構特點和調控方式,一個mirna可以調控上百個靶基因,一個靶基因也可以被多個mirna調控,從而構建了一個復雜交錯的調控 *** 。miRNA調控功能的解釋離不開miRNA調控靶基因的鑒定。
生物信息學預測可以發現大量潛在的miRNA靶基因,但生物信息學預測的靶基因假陽性率高,必須通過實驗來證實,極大地影響了靶基因探索的效率。同時,當miRNA與靶基因高度錯配時,可能會丟失很多真正的靶基因。通過實驗鑒定miRNA靶基因將是一種更為準確的方法,因此Degradome測序應運而生。
Degradome sequencing的主要降解基團,顧名思義,是降解的RNA片段,具體來說就是這里的mRNA的降解(或剪切)片段。Degradome測序又稱大規模平行末端分析,是利用高通量測序技術對降解(或剪切)的mRNA片段進行測序分析,準確高效地篩選miRNA的靶基因。
具體來說,靶基因被miRNA切割后會產生兩個片段,5’片段和3’片段。其中,3’切割片段,含有游離的5’單磷酸和3’多聚腺苷酸尾,可被RNA連接酶連接,連接產物經擴增后可用于下游高通量測序;而完整的mRNA具有5’帽子結構,5&優優資源網#39具有帽子結構;切下的片段或其他缺少5 "單磷酸基團的RNA不能被RNA連接酶連接,因此不能進入下游測序實驗。結合miRNA切割的特點和相關的分析工具,可以在全球范圍內大規模地識別miRNA切割的靶基因。
將降解群數據與mRNA序列進行對比,可以直觀地發現,mRNA序列中的某個位點會出現一個峰,這個位點就是候選的miRNA切割位點(如下優優資源 *** 圖所示)。
degradome測序的顯著性表明degradome測序更適合于植物miRNA的靶基因鑒定。Degradome測序基于真實的實驗數據識別出miRNA切割的目標基因,不僅可以高通量找到miRNA的目標基因,還可以進一步縮小后續研究的范圍,大大簡化后續驗證工作的Yoyo資源 *** ,大大提高數據的準確性和說服力。
看完之后對degradome測序有所了解嗎?下次有人問你,你可以自豪地說,這是常識,就算你不知道這個,那和咸魚干有什么區別?哈哈哈~
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